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DNA甲基化测序

       DNA的甲基化修饰是基因表达调控的一种重要手段,基因组DNA甲基化分布的有序建立和维持对保证个体正常发育至关重要,相反,如果这套甲基化调控机制出现问题,细胞功能将发生不正常改变,可能导致细胞癌变,因此基因甲基化研究是肿瘤机制研究中的一大热点。DNA的甲基化主要发生在CpG岛,其甲基化状态的确定可以通过DNA甲基化测序的方法来实现。

技术方法:
我们将样本经Bisulfite处理后,甲基化的胞嘧啶(C)保持不变,但非甲基化的胞嘧啶被转化成脲嘧啶,因此在利用该处理产物作为模板的PCR产物中,甲基化的胞嘧啶还是胞嘧啶,但非甲基化胞嘧啶变成了胸腺嘧啶,通过测序可以很容易看出目的片断哪些胞嘧啶是甲基化的,哪些没有,而且还可以对甲基化比例作初步分析。其技术原理简图如下:

 
应用领域:
此方法广泛应用于肿瘤基因组学和疾病基因组学的研究。
 
检测对象:
DNA样本
 
服务内容:
  1. DNA样本的质检与标化;
  2. 引物的设计、合成与优化;
  3. DNA的Bisulfite处理;
  4. 目的CpG岛扩增与测序;
  5. 测序结果分析与整理。
检测实例:
甲基化处理样本(TOP)和全扩样本(BOTTOM)的BISULFITE SEQUENCING图
 

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