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DNA抽提

       从各种来源的含基因组DNA的样本中提取分子生物学实验需要的基因组DNA。
 
技术方法:
针对不同样品类型进行预处理后,使用蛋白酶K,RNase A以及SDS进行细胞裂解及蛋白降解,经酚-氯仿-异戊醇抽提后用无水乙醇沉淀析出基因组DNA,后用1X TE溶解,获得高质量基因组DNA。对需要后续用于特殊高成本实验如芯片杂交、二代测序等的样本DNA抽提,我们将视需要在普通抽提过程的基础上做适当修改,可通过挑取丝状析出物、充分洗涤过夜、再沉淀、溶解等步骤获取最高质量DNA。根据客户要求我们可以使用客户提供的特定试剂盒进行抽提,并做后续DNA质控。
 
应用领域:
涉及到分子生物学、遗传学、基因组学的几乎所有以DNA为分析对象的实验研究领域。
 
样本要求:
新鲜抗凝全血(非肝素抗凝)、冷冻抗凝全血(非肝素抗凝)、白细胞悬浊液、口腔刮棒(口水)、石蜡切片、蜡块组织、羊水、指甲、毛囊、精液(精斑)、血卡、新鲜组织、腹水等,特殊样本请先咨询。
 
服务内容:
  1. 根据不同样品特点和后续实验DNA要求抽提基因组DNA并进行质控。
  2. 电泳质检(附加免费服务):琼脂糖凝胶电泳。此方法更加直观的了解样本DNA有效浓度、降解程度、溶解程度以及蛋白污染程度。
  3. 精确定量并标化:根据客户要求,可以利用荧光分子嵌入DNA双链发光原理对样本DNA进行精确定量,标化到适当浓度,满足后续实验的要求,并利用PCR反应检测样本DNA的PCR扩增有效性。
  4. 分光光度计质检:根据客户要求,采用Eppendorf Biophotometerplus对高质量要求的DNA样本进行A230、A260、A280、A340数值的检测,计算样本DNA浓度、A260/A280以及A260/A230的数值。
 
 
检测实例:
 
  1. 抗凝外周血抽提DNA电泳图:

marker(Lambda DNA/EcoRI+HindIII)
 
  1. 抽提得到的基因组DNA进行PCR质量验证:

 
 
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