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RNA抽提

       从某一特定组织细胞中获得可供分子生物学研究实验的总RNA。
 
技术方法:
针对不同样品类型进行预处理后,使用Trizol (Invitrogen)试剂进行抽提总RNA。对于石蜡块/切片中RNA的抽提,采用高浓度蛋白酶消化处理后,经酚-氯仿-异戊醇抽提后用无水乙醇沉淀析出、溶解。 根据客户要求,TRIZOL抽提的RNA也可用DNase I处理,去除DNA。根据客户要求可以使用特定试剂盒抽提RNA,并进行后续RNA质控。
 
应用领域:
涉及分子生物学和基因组学表达水平分析及基因功能研究的以RNA为分析对象的实验研究领域。
 
样本要求:
新鲜血液/组织/培养细胞(离体/收集后非冷冻状态下0.5-2小时内)、液氮保存的组织/分离白细胞/培养细胞、RNAlater充分浸透保护的组织/分离白细胞/培养细胞(低温保存一个星期之内)、Trizol充分裂解后的组织/分离白细胞/培养细胞(低温保存3天之内)、经福尔马林固定的组织石蜡包埋块(优先)或石蜡切片。每次抽提的样本用量:组织为<100mg左右,血液<1ml, 分离白细胞或培养细胞<1x107个,石蜡包埋块一块,石蜡切片6张以上。
 
服务内容:
  1. 不同类型样品的总RNA抽提
  2. 电泳质检(附加免费服务):琼脂糖凝胶电泳。此方法可以直观的了解总RNA的抽提质量、大致浓度、降解程度等
  3. 分光光度计质检:根据客户要求,利用分光光度计检测样本的RNA浓度及纯度, 并根据浓度将样本标化到客户指定浓度。
  4. RNA样本纯化:根据客户要求,对抽提的总RNA用RNase-Free的DNase I消化污染DNA后进行酚-氯仿抽提和无水乙醇沉淀。
     
   

图1. 原理图

 
检测实例:
琼脂糖凝胶电泳检测 RNA样本的抽提效果
 
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